PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Lymph node status is considered an important clinical prognostic factor in canine mammary carcinomas and women’s breast neoplasms. However, occult isolated tumor cells (ITCs) can be missed during hematoxylin and eosin (HE) analyses. Immunohistochemistry (IHC) for cytokeratin can be used to detect carcinomatous occult ITCs in mammary drainage lymph nodes. However, brown pigments, such as hemosiderin and ceroid in lymph nodes, may hinder the search for occult metastases by IHC utilizing DAB (3,3′-diaminobenzidine) as the chromogen. The aim of this study was to identify ITCs in canine lymph nodes of cases in which it was not detectable by routine HE evaluation through IHC for cytokeratin (AE1/AE3) combined with histochemistry techniques, such as Perls’ Prussian blue and periodic acid-Schiff (PAS), to improve the detection of occult metastases when hemosiderin and ceroid were present in these lymph nodes. For this, 25 tubulopapillary mammary carcinomas with their respective submitted 29 regional lymph nodes, previously given as free of tumor cells by HE analyses, were selected. Mammary tumors were graduated, and vascular invasion was investigated in these tumors. The submitted lymph nodes were reevaluated in HE, looking for occult metastases. IHC for cytokeratin (AE1/AE3) was used to detect occult metastases in mammary lymph nodes. Subsequently, a combined technique of IHC with Perl’s Prussian blue (for hemosiderin) or PAS (for ceroid) was performed to optimize the detection of ITCs by IHC, distinguishing them from pigments. Occult metastases were classified by their microanatomical location in subcapsular, cortical and medullary. Hemosiderin and ceroid were searched in lymph nodes and quantified as low, moderate, or high. The amount of pigments with a percentage of ITCs was also compared. Isolated tumor cells were found in 24.1% (7/29) of mammary lymph nodes. These ITCs were located mainly in subcapsular sinuses (4/7; 57.1%), followed by cortical (2/7; 28.5%) and medullary sinuses (1/7; 14.3%). There were concomitant lymph nodes with ITCs in 33.4% (2/6) of cases with vascular invasion. Hemosiderin and ceroid were present in about 90% of the 29 lymph nodes analyzed. In 42.8% (3/7) of lymph nodes with ITCs, hemosiderin and/or ceroid were in the same location as ITCs. It was found that lymph nodes in which ITCs were detected also present high amounts of hemosiderin (3/7; 42.9%) and low amounts of ceroid (5/7; 71.4%). In this study, IHC for cytokeratin (AE1/AE3) was an efficient method to detect occult tumor cells. IHC combined with Perls’ Prussian blue or with PAS proved to be a helpful way to investigate the presence of occult metastases in the lymph nodes of mammary canine tumors. It allowed distinguishing hemosiderin and ceroid, respectively, from ITCs in the same slide of IHC (immunostained by DAB), favoring a more accurate analysis by pathologists, which can be useful for the oncological staging of these patients.

• Immunohistochemistry isolated tumor cells cytokeratin lymph nodes mammary tumors

Abstract in Portuguese:

O status nodal é considerado um importante fator prognóstico clínico em cães com carcinomas mamários e em mulheres com neoplasmas mamários. No entanto, durante a análise histopatológica convencional (coloração de hematoxilina e eosina - HE), células neoplásicas podem permanecer ocultas no linfonodo. Imuno-histoquímica (IHQ) para citoqueratina pode ser utilizada para detectar células carcinomatosas isoladas ocultas em linfonodos de drenagem mamária. Entretanto, a presença de pigmentos marrons, como a hemossiderina e o ceroide em linfonodos, pode dificultar a procura por metástases ocultas durante a análise por IHQ utilizando o DAB (3,3′-diaminobenzidina) como cromógeno. O objetivo deste estudo foi identificar células tumorais isoladas (CTIs), não detectadas pela avaliação de rotina (HE), em linfonodos de cães, através de IHQ para citoqueratina (AE1/AE3) combinada com técnicas histoquímicas, como azul da Prússia e ácido periódico Schiff (PAS), para otimizar a detecção de metástases ocultas, quando os pigmentos hemossiderina e ceroide estavam presentes nos linfonodos. Para esta finalidade, 25 carcinomas mamários túbulo-papilares com seus respectivos 29 linfonodos regionais remetidos, previamente diagnosticados como livres de células neoplásicas pelo HE foram selecionados. Os tumores mamários foram graduados e a presença de invasão vascular foi investigada nestes tumores. Os linfonodos submetidos foram reavaliados histologicamente no HE, à procura de metástases ocultas. IHQ para citoqueratina (AE1/A3) foi utilizada para detectar metástases ocultas nos linfonodos mamários. Subsequentemente, técnicas combinadas de IHQ com azul da Prússia (para hemossiderina) ou PAS (para ceroide) foram realizadas para otimizar a detecção de CTIs através da IHQ, distinguindo-as dos pigmentos. As metástases ocultas foram classificadas pela sua região microanatômica nodal em subcapsular, cortical e medular. Hemossiderina e ceroide foram identificados no linfonodo e classificados de acordo com sua quantidade em baixa, moderada e alta. Também foram comparadas a quantidade de pigmentos com a porcentagem de CTIs. Foram encontradas CTIs em 24,1% (7/29) dos linfonodos mamários. Estas CTIs estavam localizadas principalmente em seios subcapsulares (4/7; 57,1%), seguido pela cortical (2/7; 28,5%) e seios medulares (1/7; 14,3%). Em 33,4% (2/6) dos casos com invasão vascular havia, concomitantemente, linfonodos de drenagem com CTIs. Hemossiderina e ceroide estavam presentes em cerca de 90% dos 29 linfonodos analisados. Em 42,8% (3/7) dos linfonodos com CTIs, hemossiderina e/ou ceroide estavam na mesma localização das CTIs. Os linfonodos que apresentaram CTIs também apresentavam grande quantidade de hemossiderina (3/7; 42,9%) e pequena quantidade de ceroide (5/7; 71,4%). Neste estudo, IHQ para citoqueratina (AE1/AE3) foi um método eficiente para detecção de células tumorais ocultas. A técnica combinada de IHQ com azul da Prússia ou com o ácido periódico de Schiff (PAS) mostrou ser uma maneira útil de investigar a presença de metástases ocultas em linfonodos de cães com tumores mamários caninos, distinguindo a hemossiderina e o ceroide, respectivamente, de CTIs na mesma lâmina de IHQ (imunomarcadas por DAB), favorecendo uma análise mais acurada pelos patologistas, o que pode ser útil no estadiamento oncológico destes pacientes.

• Imuno-histoquímica células tumorais isoladas citoqueratina linfonodos tumores mamários

Abstract in English:

Cryptococcosis is a fungal infection that commonly affects dogs and cats, often manifesting with neurological involvement. This study investigated the neuropathological characteristics of cryptococcosis in nine cats and two dogs submitted to necropsy through gross pathology and histopathological analysis. Clinical history, lesion location, fungal burden, type and intensity of inflammatory infiltrate, lesions in nervous parenchyma, and morphological characteristics of yeast cells were evaluated. Additionally, fungal morphological criteria, such as capsule and yeast wall thickness and budding frequency, were analyzed in each neurolocation. The Alcian blue stain method was utilized to enhance the visualization of yeasts. Debilitating and/or immunosuppressive conditions were described in five cases. Two cats were recently adopted from the streets, and one cat was treated with corticosteroids. One dog had severe cachexia and generalized weakness, and another dog had leukopenia with left shift. Only six cases (54%) had neurological signs. Gross central nervous system (CNS) lesions were found in five cases and appeared as irregular, friable, soft, gelatinous, and grayish masses with distinct borders. The telencephalic cortex and the cerebellum were the most frequently affected CNS locations observed in all cases. The first exhibited a higher fungal burden and a milder inflammatory response than other neurolocations. The cerebellum was also affected in all cases but showed a slightly higher inflammatory response and a lower fungal burden compared to the telencephalic cortices. Additionally, lung involvement was observed in all cases as well. The inflammatory intensity associated with the yeasts in the CNS was predominantly mild to moderate, being severe only in two cases, and the fungal burden was more often moderate or severe, being mild in only two cases. The observed heterogeneity in the inflammatory response and fungal burden reveals the complex nature of this infection. Other affected nervous tissues were the optic nerve, the spinal cord nerve roots and the ganglia, mostly in cats. In conclusion, our study shows the neuropathological features of cryptococcosis in a case series in cats and dogs, emphasizing the importance of considering specific neurolocations to diagnose this fungal infection and contributing to a better understanding of the simultaneous involvement of the respiratory and nervous systems.

• Cryptococcosis histopathology neurolocation nervous system dogs cats

Abstract in Portuguese:

A criptococose é uma infecção fúngica que comumente afeta cães e gatos, muitas vezes se manifestando com envolvimento neurológico. Neste estudo, foram investigadas as características neuropatológicas da criptococose em nove gatos e dois cães submetidos à necropsia, por meio da análise macroscópica e histopatológica. Foi avaliada a história clínica, localização das lesões, carga fúngica, tipo e intensidade do infiltrado inflamatório, lesões no parênquima nervoso e características morfológicas das células de levedura. Além disso, critérios morfológicos fúngicos, como espessura da cápsula e parede da levedura e frequência de brotamento, foram analisados em cada neurolocalização. Para aprimorar a visualização das leveduras, foi utilizada a técnica de coloração de azul alciano. Condições debilitantes e/ou imunossupressoras foram detectadas em cinco casos. Condições debilitantes e/ou imunossupressoras foram descritas em cinco casos. Dois gatos foram recentemente adotados das ruas e um gato foi tratado com corticosteroides. Um cão apresentava caquexia grave e fraqueza generalizada e outro cão apresentava leucopenia com desvio à esquerda. Apenas seis casos (54%) apresentaram sinais neurológicos. Lesões macroscópicas no sistema nervoso central (SNC) foram encontradas em cinco casos, aparecendo como massas irregulares, friáveis, moles, gelatinosas e acinzentadas, com bordas distintas. O córtex telencefálico e o cerebelo foram as localizações do SNC mais frequentemente afetadas, observadas em todos os casos. O córtex apresentou uma carga fúngica mais elevada e uma resposta inflamatória mais branda em comparação com outras neurolocalizações. O cerebelo também foi afetado em todos os casos, apresentando uma resposta inflamatória um pouco mais elevada e carga fúngica mais baixa do que o córtex telencefálico. Além disso, o envolvimento pulmonar também foi observado em todos os casos. A intensidade inflamatória associada às leveduras no SNC, foi predominantemente leve a moderada, sendo grave apenas em dois casos, e a carga fúngica foi mais frequentemente moderada ou grave, sendo leve em apenas dois casos. A heterogeneidade observada na resposta inflamatória e carga fúngica revela a natureza complexa dessa infecção. Outros tecidos nervosos afetados foram o nervo óptico e as raízes e gânglios nervosos da medula espinhal, principalmente em gatos. Em conclusão, nosso estudo mostra as características neuropatológicas da criptococose em uma série de casos em gatos e cães, enfatizando a importância de considerar neurolocalizações específicas para o diagnóstico dessa infecção fúngica. Além disso, contribui para uma melhor compreensão do envolvimento simultâneo dos sistemas respiratório e nervoso.

• Criptococose histopatologia neurolocalização sistema nervoso caninos felinos

Abstract in English:

Rabies is a fatal viral disease that affects animals and humans and is widespread among national ecological systems. We describe the anatomopathological and immunohistochemical findings of a case of rabies in a jaguarundi (Herpailurus yagouaroundi) found in a rural peri-domestic area after showing aggression and attacking two animals. Histopathology of brain tissue showed lymphoplasmacytic meningoencephalitis associated with intracytoplasmic eosinophilic inclusion bodies in neurons, gliosis and neuronophagia. The diagnosis of rabies was based on the lesions and confirmed by immunohistochemistry and qPCR. In Brazil, rabies in wild felines of the genus Puma has only been described in animals through serological examinations. The pathological findings are essential for the diagnosis and elucidation of the participation of this species in the wild cycle of the disease, as well as in the maintenance and conservation of the balance of wild fauna.

• Viral encephalitis Lyssavirus zoonosis Herpailurus yagouaroundi jaguarundi wild felids

Abstract in Portuguese:

A raiva é uma doença viral fatal que afeta animais e o homem, estando disseminada entre os sistemas ecológicos nacionais. Descrevem-se os achados anatomopatológicos e imuno-histoquímicos de um caso de raiva em um jaguarundi (Herpailurus yagouaroundi), encontrado em área peridomiciliar rural, após apresentar agressividade e ataque a dois animais. Microscopicamente, observou-se meningoencefalite linfoplasmocítica associada a corpúsculos de inclusão intracitoplasmáticos eosinofílicos em neurônios, gliose e neuronofagia. O diagnóstico de raiva foi estabelecido pelos achados patológicos e confirmado por imuno-histoquímica e qPCR. A ocorrência de raiva em felinos silvestres do gênero Puma só foi descrita por meio de exames sorológicos. Os achados patológicos são essenciais para o diagnóstico e elucidação da participação desta espécie no ciclo silvestre da doença, bem como na manutenção e conservação do equilíbrio da fauna silvestre.

• Encefalite viral Lyssavirus zoonoses Herpailurus yagouaroundi jaguarundi felídeos silvestres

Abstract in English:

Bothrops atrox is the most common viper in the Amazon, and its venom causes local and systemic changes. This report describes the clinicopathological and laboratory findings of ophidism due to Bothrops in six horses in Pará, Brazil. The animals, which belonged to five different rural properties, showed clinical signs of apathy, anorexia, and increased touch sensitivity in areas of increased volume. Three animals were bitten in the distal part of the pelvic limbs and three in the head area. The affected animals in the distal limb area exhibited marked edema extending from the fetlock to the thigh and had difficulty moving. Those affected in the head region exhibited an increase in volume that gave the appearance of a “rhinoceros head,” as well as blackening of the mucosa of the lips and gums. All animals exhibited tachycardia and tachypnea, and laboratory findings of two animals showed anemia, leukocytosis, increased clotting time, and elevated liver (AST and GGT) and kidney enzymes (urea and creatinine). Treatment was ineffective, and three of four treated animals died. Necropsy was performed on three animals, revealing extensive hemorrhage in the tissues at the snake bite sites and incoagulable bloody fluid in the cavities. Congestion was observed in the diaphragm, in the serosa of the small intestine, and in lighter areas on the renal surface. Histopathology showed muscle degeneration, necrosis, acute tubular necrosis, hemorrhage, and hyaline casts in the kidneys. This case report highlights the clinicopathological findings of snakebite in horses. In addition, this seems to be the first report of bothropic envenom in a mule in Brazil.

• Ophidism Amazon mule horses clinicopathological aspects

Abstract in Portuguese:

Bothrops atrox é a serpente mais comum na Amazônia, e seu veneno provoca alterações locais e sistêmicas. Este relato descreve os achados clínico-patológicos e laboratoriais de ofidismo por Bothrops em seis equídeos no Pará, Brasil. Os animais, que pertenciam a cinco propriedades rurais diferentes, apresentaram sinais clínicos de apatia, anorexia e aumento da sensibilidade ao toque em áreas de aumento de volume. Três animais foram picados na parte distal dos membros pélvicos e três na região da cabeça. Os animais afetados na área dos membros pélvicos apresentaram edema acentuado que se estendia do boleto até a coxa e exibiam dificuldade de locomoção. Aqueles afetados na região da cabeça exibiam aumento de volume que conferia a aparência de uma “cabeça de rinoceronte”, bem como escurecimento da mucosa dos lábios e gengivas. Todos os animais apresentaram taquicardia e taquipneia, e os achados laboratoriais de dois animais evidenciaram anemia, leucocitose, aumento do tempo de coagulação e aumento das enzimas hepáticas (AST e GGT) e renais (ureia e creatinina). O tratamento foi ineficaz, e três dos quatro animais tratados faleceram. A necropsia foi realizada em três animais e foi observada hemorragia extensa no tecido dos locais da picada da serpente e líquido sanguinolento incoagulável nas cavidades. Observou-se congestão no diafragma, na serosa do intestino delgado e áreas mais claras na superfície renal. A histopatologia mostrou degeneração muscular, necrose, necrose tubular aguda, hemorragia e cilindros hialinos nos rins. Este relato destaca os achados clínico-patológicos de picada de serpente em equídeos. Além disso, parece ser o primeiro relato de envenenamento por Bothrops em uma mula no Brasil.

• Ofidismo Amazônia mula equino aspectos clínico-patológicos

Abstract in English:

Myiasis is a worsening parasitic condition in newborn sheep, requiring effective medications for healing. This article demonstrates the development of a phytotherapeutic emulgel (phytogel) composed of copaiba oil (Copaifera martii) and “barbatimão” (Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville) incorporated into a polymeric blend composed of Pluronic® F127 and Carbopol® 934P. The formulation demonstrated antimicrobial potential by inactivating the bacteria Staphylococcus aureus. Administering the phytotherapeutic to the umbilicus of newborn lambs for five days effectively promoted healing and prevented inflammation and myiasis. The erythrogram and leukogram of the animals showed statistical equivalence between the animals treated with the phytotherapeutic and iodine. Furthermore, the human intervention index of the phytogel was lower when compared to iodine. The results underscore the medication’s potential, warranting further studies in veterinary medicine.

• Myiasis copaiba oil barbatimão wounds navel healing sheep

Abstract in Portuguese:

Miíase é um quadro de parasitismo agravante em ovinos recém-nascidos, requerendo medicamentos eficazes para cicatrização. Este artigo demonstra a obtenção de emulgel fitoterapêutico composto por óleo de copaíba (Copaifera martii) e barbatimão (Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville) incorporado em uma blenda polimérica composta por Pluronic® F127 e Carbopol® 934P. A formulação mostrou potencial antimicrobiano inativando a bactéria Staphylococcus aureus. A administração do fitoterápico no umbigo de cordeiros recém-nascidos durante cinco dias mostrou adequada cicatrização, não permitindo a ocorrência de inflamação ou miíase. O eritrograma e leucograma dos animais mostraram equivalência estatística entre os animais tratados com o fitoterápico e iodo. Ainda, o índice de intervenção humana do emulgel fitoterapêutico foi menor quando comparado ao iodo. O conjunto de resultados evidenciaram o potencial do medicamento desenvolvido, sendo um candidato para outros ensaios na clínica veterinária.

• Miíase óleo de copaíba barbatimão feridas cicatrização de umbigo ovinos

Abstract in English:

Botulism is a neuroparalytic disease caused by ingesting neurotoxins (BoNTs) produced by the anaerobic bacterium Clostridium botulinum. It is a significant cause of cattle mortality in Brazil. BoNTs block the release of acetylcholine at the neuromuscular synapses and cause muscle flaccidity. The diagnosis of botulism is challenging due to two main factors: the absence of macro and microscopic lesions and the difficulties inherent in laboratory tests considered the gold standard for botulism. Due to these difficulties, reviews of botulism diagnoses in Mato Grosso do Sul and extensively in the Center-West of Brazil became discrepant according to the diagnostic methodology used, making it difficult to correctly assess the disease’s prevalence, epidemiology, and clinical picture. This study aimed to review the diagnoses of botulism in cattle reported in Brazil, comparing the criteria used in each case. We studied the cause, the pathogenesis, clinical signs, and all the diagnosis methods applied to botulism. Based on the subject reviewed, we propose a diagnostic protocol based on standards adequate to the Brazilian circumstances. We also reviewed the critical diseases of cattle diseases to be included in the differential diagnosis of botulism.

• Clostridial diseases botulism livestock cattle BoNTs peripheral nervous system

Abstract in Portuguese:

O botulismo é uma doença neuroparalítica causada pela ingestão de neurotoxinas (BoNTs) produzidas pela bactéria anaeróbica Clostridium botulinum. É uma causa significativa de mortalidade de bovinos no Brasil. As BoNTs bloqueiam a liberação de acetilcolina nas sinapses neuromusculares e causam flacidez muscular. O diagnóstico do botulismo é desafiador devido a dois fatores principais: a ausência de lesões macro e microscópicas e as dificuldades inerentes aos exames laboratoriais considerados padrão ouro para o botulismo. Devido a essas dificuldades, as revisões de diagnósticos de botulismo no Mato Grosso do Sul e extensivamente no Centro-Oeste do Brasil tornaram-se discrepantes de acordo com a metodologia diagnóstica utilizada, dificultando a avaliação correta da prevalência, da epidemiologia e do quadro clínico da doença. Este estudo teve como objetivo revisar os diagnósticos de botulismo em bovinos notificados no Brasil, comparando os critérios utilizados em cada caso. Estudamos a causa, a patogênese, os sinais clínicos e todos os métodos de diagnóstico aplicados ao botulismo. Com base no assunto abordado, propomos um protocolo diagnóstico baseado em padrões adequados às circunstâncias brasileiras. Também revisamos as doenças críticas de bovinos a serem incluídas no diagnóstico diferencial de botulismo.

• Doenças de clostrídios botulismo bovinos BoNTs sistema nervoso periférico

Abstract in English:

The aim of this study was to determine the occurrence of infection by Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Babesia vogeli, and Hepatozoon canis in dogs from the semiarid region of Rio Grande do Norte state. Also, we evaluated the characteristics that favor the infection by E. canis and the presence of Rhipicephalus sanguineus s.l. ticks. For that, 120 dogs were included, from which blood samples were collected for DNA extraction and molecular diagnosis of these four pathogens. Anamnesis and physical examination were performed on each patient, and all properties were characterized. Chi-square and Fisher’s exact tests were used to verify the association of the studied variables. The most prevalent pathogen in the study was E. canis (13.3%), followed by A. platys (11.7%), H. canis (6%) and B. vogeli (6%). Correspondence analysis performed between E. canis positivity and the variables studied showed the influence of factors such as tick history, non-vaccination and non-use of antiparasitic medications. The main environmental factor observed in the infection by E. canis was the presence of trees and vegetation in the residences. Recognizing these characteristics can help elaborate prevention and control strategies since environmental management activities seek to reduce the interaction between vector and host and, consequently, the exposure to diseases.

• Ticks Rhipicephalus sanguineus environmental management vector-borne diseases PCR semiarid region

Abstract in Portuguese:

O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de infecção por Ehrlichia canis, Anaplasma platys, Babesia vogeli e Hepatozoon canis em cães da região semiárida do estado do Rio Grande do Norte. Ainda, foram avaliadas as características que favorecem a infecção por E. canis e a presença de carrapatos Rhipicephalus sanguineus s.l. Para tanto, foram incluídos 120 cães, dos quais foram coletadas amostras de sangue para extração de DNA e diagnóstico molecular desses quatro patógenos. Foi realizada anamnese e exame físico de cada paciente e todas as propriedades foram caracterizadas. Os testes Qui-quadrado e exato de Fisher foram utilizados para verificar a associação das diferentes variáveis estudadas. O patógeno de maior prevalência no estudo foi E. canis (13,3%), seguido por A. platys (11,7%), H. canis (6%) e B. vogeli (6%). A análise de correspondência realizada entre a positividade de E. canis e as variáveis estudadas, demonstrou influência de fatores como histórico de carrapatos, ausência de vacinação e ausência de uso de medicações antiparasitárias. Os principais fatores ambientais observados na infecção por E. canis foram a presença de árvores e jardins nas residências. O reconhecimento dessas características pode auxiliar na elaboração de estratégias de prevenção e controle, visto que atividades de manejo ambiental buscam reduzir a interação entre vetor e hospedeiro e, consequentemente, a exposição a doenças.

• Carrapatos Rhipicephalus sanguineus manejo ambiental doenças transmitidas por vetores PCR região semiárida

Abstract in English:

Bovine viral diarrhea virus (BVDV) can cause acute and persistent infections in cattle, resulting in significant economic losses to the livestock industry each year. Targeted antiviral therapy is an effective strategy. This study was based on network pharmacology, molecular docking techniques and in vitro studies to investigate quercetin’s mechanism in treating bovine viral diarrhea/mucosal disease (BVD-MD). The network topology analysis was carried out using Cytoscape 3.9.0 software to construct the network of “Chinese medicine ingredients-target-diseases”. Protein interactions were explored and analyzed using the String system (PPI). GO and KEGG pathway analysis of the intersected targets was performed using Bioconductor software. The molecular docking and molecular dynamics simulation methods were used to reveal the degree of binding of quercetin to key target genes. Western blot and indirect immunofluorescence were used to characterize the antiviral effects of quercetin. This study utilized network pharmacological analysis, identifying 22 targets associated with BVD-MD. The results of the KEGG pathway showed that quercetin was closely related to Ras and MAPK signaling pathways of BVD-MD. Molecular docking results showed that SRC, NS5B, NOX4 and XDH were the key targets of quercetin in the treatment of BVD-MD. Through network pharmacology, molecular docking and in vitro experiments, quercetin was demonstrated to combat bovine viral diarrhea mucosal disease through key targets of SRC, MAPK1, GSK3B, NS5B and E2. Molecular dynamics analysis showed that quercetin exhibited complex stability with NS5B. This study provides a theoretical and experimental basis for quercetin treatment of BVD-MD and later drug development.

• BVD-MD quercetin web-based drug screening molecular docking antiviral

Abstract in Portuguese:

Bovine viral diarrhea virus (BVDV) can cause acute and persistent infections in cattle, resulting in significant economic losses to the livestock industry each year. Targeted antiviral therapy is an effective strategy. This study was based on network pharmacology, molecular docking techniques and in vitro studies to investigate quercetin’s mechanism in treating bovine viral diarrhea/mucosal disease (BVD-MD). The network topology analysis was carried out using Cytoscape 3.9.0 software to construct the network of “Chinese medicine ingredients-target-diseases”. Protein interactions were explored and analyzed using the String system (PPI). GO and KEGG pathway analysis of the intersected targets was performed using Bioconductor software. The molecular docking and molecular dynamics simulation methods were used to reveal the degree of binding of quercetin to key target genes. Western blot and indirect immunofluorescence were used to characterize the antiviral effects of quercetin. This study utilized network pharmacological analysis, identifying 22 targets associated with BVD-MD. The results of the KEGG pathway showed that quercetin was closely related to Ras and MAPK signaling pathways of BVD-MD. Molecular docking results showed that SRC, NS5B, NOX4 and XDH were the key targets of quercetin in the treatment of BVD-MD. Through network pharmacology, molecular docking and in vitro experiments, quercetin was demonstrated to combat bovine viral diarrhea mucosal disease through key targets of SRC, MAPK1, GSK3B, NS5B and E2. Molecular dynamics analysis showed that quercetin exhibited complex stability with NS5B. This study provides a theoretical and experimental basis for quercetin treatment of BVD-MD and later drug development.

• BVD-MD quercetin web-based drug screening molecular docking antiviral

Abstract in English:

Magnetic resonance imaging (MRI) plays an important role in detecting and characterizing meningeal lesions, thus assisting in a possible ante mortem clinical diagnosis of intracranial diseases. Meningeal enhancement has been described as a sign of multiple central nervous system (CNS) disorders. The aim of this study was to evaluate meningeal enhancement on MRI of the brain of dogs and to associate them with different CNS diseases. A retrospective study of 22 dogs submitted to MRI was carried out, with a history of clinical signs of neurological diseases as an inclusion criterion for selecting these animals for the study. The data were divided according to the age and sex of the animals, and the analysis criteria were regarding the CNS diseases found, location, pattern and definition of meningeal enhancement. The results demonstrate that encephalitis and neoplasia occur more frequently among the diseases observed, with 22.7% of clinical suspicions. The site with the highest incidence was the parietal/temporal/frontal, with a 27.3% prevalence, followed by the frontal, with 18.2%. Regarding the meningeal pattern, it was found that there was 90.9% more enhancement in the pial and dural regions together than when comparing them individually. When evaluating the definition of meningeal enhancement, slight enhancement was most observed (59.1%). The present study made it possible to obtain specific information and better understand the characteristics of meningeal enhancement, including two patterns of meningeal enhancement (pial and dural) and identifying the association of values in different CNS diseases in dogs.

• Brain magnetic resonance veterinary neurology small animals central nervous system

Abstract in Portuguese:

A ressonância magnética (RM) tem papel importante na detecção e caracterização das lesões meníngeas, auxiliando um possível diagnóstico clínico ante mortem de doenças intracranianas. O realce meníngeo tem sido descrito como um sinal de múltiplas enfermidades do sistema nervoso central (SNC). O objetivo deste estudo foi avaliar o realce meníngeo nas RM do encéfalo de cães e associá-las às diferentes doenças do SNC. Foi realizado um estudo retrospectivo de 22 cães submetidos ao exame de RM, com o histórico de sinais clínicos de doença neurológica como critério de inclusão para seleção destes animais ao estudo. Os dados foram divididos de acordo com a idade e sexo dos animais e os critérios de análise foram, quanto às enfermidades do SNC encontradas, local, padrão e definição do realce da meninge. Os resultados obtidos demonstram que, dentre as doenças observadas, a encefalite e a neoplasia ocorrem com maior frequência, ambas com 22,7% de suspeitas clínicas. O local de maior incidência foi determinado como sendo o parietal/temporal/frontal, com 27,3% de prevalência, seguido do frontal com 18,2%. Com relação ao padrão da meninge, foi verificado que houve 90,9% mais realce na região pial e dural conjuntamente do que ao compará-las individualmente. Já ao avaliar a definição do realce meníngeo, o mais observado foi o realce discreto (59,1%). O presente estudo possibilitou a obtenção de informações específicas e maior compreensão das características do realce meningeal, incluindo dois padrões de realce meníngeo (pial e dural) e a identificação da associação dos valores nas diferentes doenças do SNC em cães.

• Encéfalo ressonância magnética neurologia veterinária pequenos animais sistema nervoso central

Abstract in English:

Glomerulopathy is an important cause of kidney disease in dogs. Diagnosis is based on anamnesis, clinical examination, and complementary tests and can be complex and costly depending on the stage of the disease. Morphological evaluation of erythrocytes observed during urinalysis is frequently conducted for humans, which may help identify kidney damage in animals with kidney disease – individuals with glomerular disease present with erythrocyte dysmorphism, particularly the presence of erythrocytes recognized as acanthocytes. Animal studies are limited, and their results are often contradictory. Thus, the objective of this study was to identify the different populations of isomorphic and dysmorphic red blood cells (RBCs) present in the urine of dogs and to compare the bright-field and phase-contrast optical microscopy techniques in identifying morphological changes in RBCs during urinalysis. A total of 40 samples were selected from dogs with microscopic or macroscopic hematuria from routine care at Federal Rural University of Pernambuco Veterinary Hospital and were sent to the hospital’s Veterinary Clinical Pathology Laboratory. Physical, chemical, and sediment examinations were conducted. Subsequently, RBCs were evaluated and differentiated using bright-field and phase-contrast microscopy. In dog urine samples, it was possible to identify all populations considered isomorphic and dysmorphic that are described in humans. Among those considered isomorphic, normal RBCs, annulocytes, and echinocytes were observed, whereas stomatocytes, acanthocytes, codocytes, ghost cells, knizocytes and cells with no defined names (other) were found among the dysmorphic forms. No significant difference was observed between the two microscopic techniques used to differentiate and classify erythrocytes. Therefore, it is possible to identify and differentiate the morphological alterations found in RBCs in dogs’ urine. Compared with a phase-contrast microscope, a conventional optical microscope can be used without any detrimental effects, thereby facilitating the use of this technique in the laboratory routine, as it is cost-effective. Further studies should be conducted to evaluate the sensitivity and specificity of the identification of erythrocyte dysmorphism as an early marker of glomerular lesions.

• Glomerular injury erythrocyte dysmorphism erythrocyte isomorphism dogs urinalysis

Abstract in Portuguese:

As glomerulopatias são importantes causas de afecções renais em cães. Seu diagnóstico é baseado na anamnese, exame clínico e exames complementares e pode se tornar complexo e oneroso dependendo da fase da doença. Uma avaliação frequentemente utilizada na medicina humana e que pode auxiliar na localização da lesão renal em animais com doença renal é a avaliação morfológica dos eritrócitos observados na urinálise. Indivíduos com doença glomerular apresentam dismorfismo eritrocitário, especialmente com a presença de eritrócitos reconhecidos como acantócitos. Estudos em animais são escassos e seus resultados muitas vezes são contraditórios. Dessa forma, objetivou-se identificar as diferentes populações de hemácias isomórficas e dismórficas presentes na urina de cães e comparar as técnicas de microscopia óptica de campo claro e de contraste de fase na identificação de alterações morfológicas em hemácias durante a realização da urinálise. Foram selecionadas quarenta amostras de urina de cães com hematúria microscópica ou macroscópica, oriundas da rotina de atendimento do Hospital Veterinário da UFRPE e enviadas ao Laboratório de Patologia Clínica Veterinária desta instituição. As amostras passaram por exame físico, químico e do sedimento, sendo posteriormente as hemácias avaliadas e diferenciadas utilizando-se os métodos de microscopia de campo claro e de contraste de fase. Nas amostras de urina de cães, foi possível identificar todas as populações consideradas isomórficas e dismórficas já descritas em humanos. Dentre as consideradas isomórficas foram observadas hemácias normais, anulócitos e equinócitos e dentre as formas dismórficas foram encontradas estomatócitos, acantócitos, codócitos, células fantasmas, nizócitos e células ainda sem nomenclatura definida (outros). Não foi observada diferença significativa entre as duas técnicas microscópicas empregadas na diferenciação e classificação dos eritrócitos. Conclui-se que é possível identificar e diferenciar as alterações morfológicas encontradas nas hemácias de urinas de cães e que o uso de microscópio óptico tradicional convencional, quando comparado ao microscópio de contraste de fase, pode ser empregado sem grande prejuízo para o exame, facilitando a utilização dessa técnica na rotina laboratorial por ser um equipamento mais acessível. Outros estudos devem ser realizados para avaliar a sensibilidade e especificidade do uso da identificação do dismorfismo eritrocitário como um marcador precoce de lesões glomerulares.

• Lesão glomerular dismorfismo eritrocitário isomorfismo eritrocitário urinálise