PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Caseous lymphadenitis (CLA) is a chronic infectious disease caused by Corynebacterium pseudotuberculosis, resulting in significant economic losses in sheep and goat farming. Considering limited treatment options, the use of natural compounds has emerged as a promising alternative. This study aimed to evaluate the antibacterial potential of essential oils from Lippia origanoides (EOLO) and Ocimum micranthum (EOOM) against C. pseudotuberculosis strains isolated from small ruminants with clinical CLA. Thirty isolates were genotypically characterized using quadruplex polymerase chain reaction (PCR) (16S rRNA, rpoB, pld, narG genes). The essential oils were extracted by hydrodistillation, and their chemical compositions were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Antibacterial activity was determined by disk diffusion and broth microdilution assays. Minimum inhibitory concentration resulting in complete growth inhibition (MIC₁₀₀) and minimum bactericidal concentrations leading to complete bacterial eradication (MBC₁₀₀) were determined. Susceptibility to penicillin and tetracycline was assessed by disk diffusion. All strains were confirmed as biovar ovis (16S rRNA⁺, rpoB⁺, pld⁺, narG⁻). EOLO presented thymol (66.23%) as the major compound, while eugenol (38.62%) was the principal constituent in EOOM. EOLO exhibited large inhibition zone diameters (IZD), ranging from 40.67 mm to 98.33 mm, indicating strong activity. EOOM also demonstrated strong inhibition, with IZD values between 18.67 mm and 31.67 mm. All isolates were classified as “I” for penicillin (susceptible, increased exposure) and as susceptible (“S”) to tetracycline. EOLO showed MIC₁₀₀ values ranging from 15 to 250 µg/mL, while EOOM ranged from 62.5 to 125 µg/mL. MBC₁₀₀ values ranged from 125 to 1,000 µg/mL. This study seems to be the first report of the in vitro antibacterial activity of EOLO and EOOM against C. pseudotuberculosis, highlighting their potential as effective, natural alternatives for the treatment and control of CLA in small ruminants.

• Bactericidal activity Lippia origanoides Ocimum micranthum essential oil small ruminants

Abstract in Portuguese:

A linfadenite caseosa (LC) é uma doença infecciosa crônica causada pela bactéria Corynebacterium pseudotuberculosis que provoca perdas econômicas significativas na ovinocaprinocultura. Considerando que as opções de tratamento são limitadas, o uso de compostos naturais representa uma alternativa promissora. O presente estudo teve como objetivo avaliar o potencial antibacteriano dos óleos essenciais de Lippia origanoides (EOLO) e Ocimum micranthum (EOOM) contra cepas de C. pseudotuberculosis isoladas de pequenos ruminantes com LC. Trinta isolados foram caracterizados genotipicamente usando reação em cadeia da polimerase (PCR) quadruplex (genes 16S rRNA, rpoB, pld, narG). Os óleos essenciais foram extraídos por hidrodestilação e suas composições químicas foram analisadas por cromatografia gasosa e espectrometria de massas (GC-MS). A atividade antibacteriana foi determinada por ensaios de disco-difusão e microdiluição em caldo. As concentrações inibitórias mínimas capazes de promover inibição completa do crescimento (CIM₁₀₀) e as concentrações bactericidas mínimas responsáveis pela erradicação bacterina completa (CBM₁₀₀) foram determinadas. A suscetibilidade à penicilina e à tetraciclina foi avaliada por difusão em disco. Todas as cepas foram confirmadas como biovar ovis (16S rRNA⁺, rpoB⁺, pld⁺, narG⁻). O EOLO apresentou o timol (66,23%) como o composto majoritário, enquanto o eugenol (38,62%) foi o principal constituinte do EOOM. O EOLO apresentou diâmetro de zona de inibição (DZI) variando de 40,67 mm a 98,33 mm, indicando forte atividade antibacteriana. O EOOM também demonstrou forte capacidade de inibição, com valores de DZI entre 18,67 mm e 31,67 mm. Todos os isolados apresentaram classificação “I” para penicilina (susceptível, com aumento da exposição) e foram classificados como sensíveis (“S”) à tetraciclina. A CIM₁₀₀ do EOLO variou de 15 a 250 μg/mL, enquanto a do EOOM variou de 62,5 a 125 μg/mL. Os valores de CBM₁₀₀ variaram de 125 a 1.000 μg/mL. Este estudo parece ser o primeiro relato da atividade antibacteriana in vitro de EOLO e EOOM contra C. pseudotuberculosis, destacando o potencial desses óleos como alternativa naturais e eficazes para o tratamento e controle de LC em pequenos ruminantes.

• Atividade bactericida Lippia origanoides Ocimum micranthum óleo essencial pequenos ruminantes

Abstract in English:

ABSTRACT.- Almeida A.C., Morão R.P., Martins E.R., Fonseca F.S.A., Souza C.N., Prates J.P.B., Oliveira F.D. & Silva L.M.V. 2016. [Antiseptic activity of the essential oil of Lippia origanoides in the presence of bovine milk.] Atividade antisséptica do óleo essencial de Lippia origanoides Cham. (Alecrim-pimenta) na presença de leite bovino. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(9):905-911. Universidade Federal de Minas Gerais, Campus Montes Claros, Av. Universitária 1000, Montes Claros, MG 39404-547, Brazil. E-mail: aca2006@ica.ufmg.br This study aimed to determine the antiseptic activity of the essential oil of Lippia origanoides in the presence of bovine milk. The essential oil chemical composition was determined by gas chromatography-mass spectrometry (CG EM) 53 compounds were detected, of which 16 were identified (>0.1% total area). The carvacrol (32.7%), p-cymene (23%), thymil methyl ether (10.03%), caryophyllene (7.98 %) and &#947;-terpinene (5.40%) were the most abundant components. The minimum inhibitory concentration for Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Escherichia coli ATCC 8739 was 60uL/mL, as for this Salmonella Choleraesuis ATCC 35640 was 90uL/mL. The minimum bactericidal concentration was 120&#956;L/mL for all three bacteria. We evaluated the antiseptic activity of the essential oil in the concentration of 120&#956;L/mL in the presence of bovine milk for the same bacterial strains. The oil under study It showed an inhibitory effect of growth of the strains in different action times (p <0.05). S. aureus showed higher inhibition rates after 5 min of contact and E. coli and Salmonella Choleraesuis after 15 min. The essential oil Lippia origanoides proved to be a natural antimicrobial potential even in the presence of organic matter consists of a complex nutritional matrix is bovine milk.

• Antiseptic activity essential oil Lippia origanoides carvacrol thymol antimicrobials atividade antisséptica óleo essencial alecrim-pimenta carvacrol timol antimicrobianos naturais

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Almeida A.C., Morão R.P., Martins E.R., Fonseca F.S.A., Souza C.N., Prates J.P.B., Oliveira F.D. & Silva L.M.V. 2016. [Antiseptic activity of the essential oil of Lippia origanoides in the presence of bovine milk.] Atividade antisséptica do óleo essencial de Lippia origanoides Cham. (Alecrim-pimenta) na presença de leite bovino. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(9):905-911. Universidade Federal de Minas Gerais, Campus Montes Claros, Av. Universitária 1000, Montes Claros, MG 39404-547, Brazil. E-mail: aca2006@ica.ufmg.br Objetivou-se determinar atividade antisséptica do óleo essencial de Lippia origanoides na presença de leite bovino. A composição química do óleo essencial de alecrim pimenta foi determinada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM), sendo detectados 53 compostos, dos quais 16 foram identificados (>0,1% área total). O carvacrol (32,7%), p-cimeno (23%), timilmetil éter, cariofileno (7,98%) e o &#947;-terpineno (5,40%) foram os componentes mais abundantes. A concentração inibitória mínima para Staphylococcus aureus ATCC 25923 e E. coli ATCC 8739 foi de 60µL/mL, enquanto para Salmonella Choleraesuis ATCC 35640 foi de 90µL/mL. A concentração bactericida mínima foi de 120µL/mL para as três bactérias. Avaliou-se a atividade antisséptica do óleo essencial na concentração de 120µL/mL na presença de leite bovino sobre as mesmas cepas bacterianas. O óleo em estudo apresentou efeito inibitório do crescimento das cepas em diferentes tempos de ação (p<0,05). S. aureus apresentou maiores índices de inibição após 5 min de contato e Escherichia coli e Salmonella Choleraesuis após 15 min. O óleo essencial de alecrim-pimenta revelou ser um potencial antimicrobiano natural, mesmo na presença de matéria orgânica constituída de uma matriz nutricional complexa que é o leite bovino.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Andrade V.A., Almeida A.C., Souza D.S., Colen K.G.F., Macêdo A.A., Martins E.R., Fonseca F.S.A. & Santos R.L. 2014. Antimicrobial activity and acute and chronic toxicity of Lippia origanoides. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(12):1153-1161. Laboratório de Patologia Molecular, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Antônio Carlos 6627, Belo Horizonte, MG 31270-000, Brazil. E-mail: rsantos@vet.ufmg.br Currently, there is a growing interest in medicinal plants, because of an increased demand for alternate therapies. In this study, the antimicrobial activity and toxicity of the essential oil of Lippia origanoides (L. origanoides) were investigated. The essential oil of L. origanoides was extracted by steam-dragging distillation and its constituents were identified by chromatography coupled with mass spectrometry. Among the 15 compounds identified, the most abundant were carvacrol (29.00%), o-cymene (25.57%), and thymol methyl ether (11.50%). The essential oil was studied in antimicrobial assays to determine the MIC and MBC. The results indicated that a concentration of 120&#956;L/mL of oil was sufficient to inhibit the growth of the following microorganisms: Escherichia coli (ATCC 25922), Staphylococcus aureus (ATCC 25923) and Salmonella cholerasuis (ATCC 10708). Acute and chronic toxic effects of orally administered oil were investigated in Wistar rats by using standard methods. Doses of 30, 60 and 120mg/kg of the essential oil did not induce significant changes in weight, behavior or hematological and biochemical parameters in the animals. There were no signs of any histopathological changes to the liver, kidneys or heart of the treated rats, suggesting that Lippia origanoides oil is non-toxic after oral administration in acute or chronic toxicity studies. The results obtained in this study show that the essential oil of L. origanoides has a high safety margin, with no detectable toxic effects in rats treated with doses to 120mg/kg. In addition, L. origanoides oil demonstrated potent antimicrobial activity against S. aureus, E. coli and S. cholerasuis. Based on these findings, this essential oil may have practical application as a veterinary antimicrobial.

• Antimicrobial activity Lippia origanoides essential oil toxicity atividade antimicrobiana toxicidade

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Andrade V.A., Almeida A.C., Souza D.S., Colen K.G.F., Macêdo A.A., Martins E.R., Fonseca F.S.A. & Santos R.L. 2014. Antimicrobial activity and acute and chronic toxicity of Lippia origanoides. [Atividade antimicrobiana, toxicidade aguda e crônica do óleo essencial de Lippia origanoides.] Pesquisa Veterinária Brasileira 34(12):1153-1161. Laboratório de Patologia Molecular, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Antônio Carlos 6627, Belo Horizonte, MG 31270-000, Brazil. E-mail: rsantos@vet.ufmg.br Atualmente nota-se um aumento do interesse pelas plantas medicinais, fruto da grande procura por terapias alternativas. Neste trabalho foi avaliada a atividade antimicrobiana e a toxicidade do óleo essencial da Lippia origanoides (alecrim-pimenta). O óleo essencial de alecrim-pimenta foi obtido por arraste com vapor d’água e seus constituintes foram identificados por cromatografia acoplada a espectrofotômetro de massa (GC/MS). Entre os 15 compostos identificados os mais abundantes foram o carvacrol (29%), o-cimeno (25,57%) e metil timol éter (11,50%). Os óleos foram submetidos a ensaios antimicrobianos para determinação da CIM e da CBM. Os resultados mostraram que a dose de 120&#956;l/mL de qualquer um dos óleos testados foi eficiente em inibir o crescimento dos micro-organismos Escherichia coli (ATCC 25922), Staphylococcus aureus (ATCC 25923) e Salmonella cholerasuis (ATTCC 10708). Os efeitos tóxicos agudos e crônicos foram verificados em animais segundo método de classes - Toxicidade aguda oral (dose fixas) - OECD 420. As concentrações de 30, 60 e 120 mg/kg de óleo essencial não induziram alterações significativas no peso, no comportamento dos animais e nem nos parâmetros hematológicos e bioquímicos. Também não houve presença de alterações histopatológicas no fígado, rins e coração sugerindo que o óleo de alecrim-pimenta é atóxico após administração oral em condições agudas ou crônicas. Os resultados obtidos neste trabalho levam a concluir que o óleo essencial de alecrim-pimenta possui uma margem elevada de segurança, com efeitos tóxicos inexistentes além de apresentar atividade antimicrobiana eficaz contra os micro-organimos S. aureus, E. coli e S. cholerasuis. Sua utilização na medicina veterinária deve ser considerada como uma grande viabilidade econômica e sustentável.